મૂળભૂત પરિચય
એરિથ્રોસાઇટ લિસેટ એ લાલ રક્ત કોશિકાઓને દૂર કરવાની સૌથી સરળ અને સરળ પદ્ધતિઓમાંની એક છે, એટલે કે, લાલ રક્ત કોશિકાઓને લિસેટ સાથે વિભાજિત કરવાની, જે ન્યુક્લિએટેડ કોશિકાઓને નુકસાન કરતું નથી અને લાલ રક્ત કોશિકાઓને સંપૂર્ણપણે દૂર કરી શકે છે. લિસેટ ક્લીવેજ એ હળવા લાલ રક્ત કોશિકાઓ દૂર કરવાની પદ્ધતિ છે, જેનો ઉપયોગ મુખ્યત્વે એન્ઝાઇમ પાચન દ્વારા વિખરાયેલા પેશી કોષોને અલગ કરવા અને શુદ્ધિકરણ માટે, લિમ્ફોસાઇટ્સના અલગ અને શુદ્ધિકરણ અને પેશી પ્રોટીન અને ન્યુક્લિકના પ્રયોગોમાં લાલ રક્ત કોશિકાઓ દૂર કરવા માટે થાય છે. એસિડ નિષ્કર્ષણ. લાલ રક્ત કોશિકાઓના લિસેટ દ્વારા મેળવેલા પેશી કોષોમાં લાલ રક્ત કોશિકાઓ હોતી નથી, અને તેનો વધુ ઉપયોગ પ્રાથમિક સંવર્ધન, સેલ ફ્યુઝન, ફ્લો સાયટોમેટ્રી, ન્યુક્લીક એસિડ અને પ્રોટીનના વિભાજન અને નિષ્કર્ષણ વગેરે માટે થઈ શકે છે.
ઉપયોગ માટે સૂચનાઓ
પેશી કોષ નમૂના
1. સ્વાદુપિંડ/એન્ઝાઇમ અથવા કોલેજનેઝ દ્વારા તાજા પેશીઓનું પાચન કરવામાં આવ્યું હતું અને સિંગલ સેલ સસ્પેન્શનમાં વિખેરાઈ ગયું હતું, અને સુપરનેટન્ટને સેન્ટ્રીફ્યુગેશન દ્વારા કાઢી નાખવામાં આવ્યું હતું.
2. રેફ્રિજરેટરમાંથી ELS lysate 4â પર લો, ELS lysate ને 1:3-5 ના ગુણોત્તરમાં સેલ પ્રિસીપીટેટમાં ઉમેરો (1ml કોમ્પેક્ટેડમાં 3-5ml lysate ઉમેરો), હળવા હાથે ફૂંકો અને મિક્સ કરો.
3. 5-8 મિનિટ માટે 800-1000rpm પર સેન્ટ્રીફ્યુજ કરો અને ઉપલા લાલ સ્પષ્ટ પ્રવાહીને કાઢી નાખો.
4. અવક્ષેપિત ભાગને 2-3 વખત હેન્કના સોલ્યુશન અથવા સીરમ-ફ્રી કલ્ચર સોલ્યુશન સાથે એકત્રિત કરવામાં આવ્યો હતો અને સેન્ટ્રીફ્યુજ કરવામાં આવ્યો હતો.
5, જો ક્રેકીંગ પૂર્ણ/પૂર્ણ ન હોય તો પગલાં 2 અને 3 નું પુનરાવર્તન કરી શકાય છે.
6. અનુગામી પ્રયોગો માટે રિસસ્પેન્શન કોષો; જો આરએનએ કાઢવામાં આવે છે, તો DEPC પાણીનો ઉપયોગ કરીને સ્ટેપ 4માંથી તૈયાર કરેલા સોલ્યુશનમાં આવું કરવું શ્રેષ્ઠ છે.
લાલ રક્ત કોશિકાઓનું જીવન ચક્ર ખૂબ જ ટૂંકું હોય છે, માત્ર 120 દિવસ, પરંતુ તેઓ ખૂબ જ ઝડપથી રક્તનું પુનઃઉત્પાદન કરે છે, અને આ કિસ્સામાં તેઓ ખાસ કરીને કોષ વિભાજન માટે સક્ષમ હોય છે, અને તે બધામાં સૌથી ઝડપી વિભાજન કરનારા કોષો છે, તેથી આ કોષ ખૂબ જ મૂલ્યવાન છે, તેથી તે સેલ કલ્ચર માટે ખૂબ જ ઉપયોગી છે. તે ખૂબ જ સરળ છે, તેમાં કોઈ ઓર્ગેનેલ્સ નથી, માત્ર કોષ પટલ અને પ્રોટીન છે.